/

Kvalitativ PCR-analys av HIV RNA. Hur de lurar oss med PCR-diagnostik för HIV

Att vi har blivit lurade av hiv/aids i 30 år är ett medicinskt faktum som inte längre behöver bevisas. Jag vill inte förolämpa någon, men sanningen är den nuvarande ögonblick, med all tillgänglig information om den alternativa synvinkeln framför oss, det vill säga presenterad av HIV-dissidenter, är det helt enkelt omöjligt att fortsätta och naivt tro på HIV/AIDS-teorin artificiellt skapad och påtvingad med hjälp av cynisk och bedräglig propaganda .

Om du uttryckte din förvirring över det faktum att diagnostiska tester för HIV inte upptäcker själva viruset, utan bara antikroppar mot det, och detta gäller inte bara för enzymkopplad immunosorbentanalys, utan också för immunoblotting, vilket anses vara mer exakt, då du har förmodligen hört försäkringarna från läkare eller några kunniga personer att det finns en polymeraskedjereaktionsmetod som inte har något med antikroppar att göra, utan som direkt upptäcker viruset självt.
Har du hört talas om PCR-diagnosmetoden, och i synnerhet HIV-infektion? Säkert. Har du testat att fördjupa dig lite i det och lista ut det? Inga? Så det är klart att vi blir lurade? Bra. Men nu ska jag visa det tydligt, på mina fingrar...

Ja, vi blir verkligen uppenbart och cyniskt lurade när de försäkrar oss om att PCR-testet för HIV bestämmer förekomsten av själva viruset eller dess koncentration i blodet, det vill säga virusmängden. Och jag ska genast säga att i detta avseende skiljer sig PCR-metoden inte bara från ELISA och IB, utan man kan säga att den är direkt baserad på exakt samma princip.
Vad betyder det? Låt mig påminna dig om att de diagnostiska HIV-testerna ELISA och Immunoblot är baserade på reaktionen av antikroppar i testprovet med virusantigener placerade i själva testet. Vad som finns i testsystemen som dessa HIV-proteiner - bara Gud vet, och förmodligen inte allt. Följaktligen är det helt oklart vilka antikroppar som reagerar med dessa förmodade HIV-proteiner, vilket resulterar i en lista på 62 artiklar över sjukdomar och tillstånd som orsakar en falsk positiv reaktion.

Vad är grunden för polymeraskedjereaktionsmetoden, och hur diagnostiseras den för närvaron av infektionssjukdomar? Vid hepatit och hiv undersöks patientens blod. För att fastställa närvaron av en specifik patogen i blodprovet som studeras, används en primer för PCR-testning, det vill säga ett DNA-fragment av själva patogenen, komplementärt till en specifik del av dess DNA, det vill säga i huvudsak primer fästs till en sektion av DNA på samma sätt som sektioner är kopplade till varandra DNA dubbelhelix.
Förstår du det? Ditt blod tas, sedan tillsätts det något som utan tvekan är en unik del av HIV-virusets genom, andra nödvändiga ingredienser tillsätts, sedan värms och kyls det hela trettio gånger, och som ett resultat - voila! du är HIV-positiv! din virusmängd är 3 miljoner! börja terapin omedelbart!

Men vänta. Kan du inte se hur du har blivit lurad från första början?
Du var säker på att PCR-metoden upptäcker själva viruset. Men detta är en ren lögn! PCR-metoden i detta avseende skiljer sig inte från ELISA och IB! Precis som okända saker används i testsystem under sken av HIV-antigener, så används i PCR-tester, under sken av primers som skickas ut som en del av själva HIV:s DNA, ett helt okänt ämne på samma sätt. Du förstår att om HIV inte existerar, då kan det inte vara tal om något HIV-DNA, eller HIV-RNA, eller antikroppar mot HIV, i synnerhet moderns antikroppar, som de lurar oss med och säger till oss att alla barn från HIV-positiva mödrar , och försvinner av sig själva under det andra levnadsåret...

Så här.
– PCR-metoden upptäcker själva HIV-viruset, här får det inte finnas några misstag eller tvivel! Och denna mest exakta metod visar virusbelastningen, vilket är mycket viktigt för att övervaka sjukdomens dynamik och dess behandling!
- Tja, tja... Pratar du om själva viruset? Vad används som primer? Samma virus? Samma som Montagnier och Gallo upptäckte för 30 år sedan? Hittade de honom verkligen? Verkligen städat? Tog du verkligen ett foto? Har det verkligen bevisats att den använder T-lymfocyter för replikation/reproduktion, som ett resultat av att deras totala antal utarmas och farlig immunbrist uppstår? Är allt detta sant?

Och i huvudsak används PCR-metoden i AIDS inte så mycket tack vare dess uppfinnare Kary Mullis (snarare, till och med tvärtemot hans åsikt!), utan tack vare Montagna och Gallo, som drog hiv ur tomma luften och vars DNA-primers används vid PCR-diagnostik av HIV...

Så här är det. Om du har fått höra att du, baserat på resultaten av PCR-testning, är HIV-positiv och du har en hög virusmängd, eller om vi pratar om ditt barn, oroa dig inte en sekund! du blir uppenbart lurad! Uppfinnaren av polymeraskedjereaktionsmetoden, mikrobiologen Kary Mullis, är en HIV-dissident, och han är kategoriskt emot användningen av PCR vid HIV-diagnostik, eftersom han förstår väl att i fallet med ett icke-existerande HIV-virus är detta helt enkelt ett uppenbart cyniskt bedrägeri...

Ett ögonblick till. Har du hört talas om odetekterbar virusmängd? Faktum är att inte alla hiv-positiva personer, när de testas för mängden virus i blodet, får ett visst resultat, vilket, beroende på värdet, anses vara en låg eller hög virusmängd. Om det fanns väldigt få sådana människor skulle det inte talas om dem alls. Men faktum är att det tydligen finns många av dem, och det är därför de talar om en oupptäckbar virusmängd vid HIV-infektion. Jag kommer inte att nämna PR-terapin som förmodligen reducerar VL till oupptäckbar. Nej, faktum är att utan någon terapi upptäcks det inte hos många människor. Aldrig.
Det vill säga att patienten har diagnostiserats med HIV-infektion, men med den berömda ultrakänsliga, rymdprecisa PCR-diagnostikmetoden är det omöjligt att hitta HIV-viruset i hans kropp. Hur så?

Och så berättar de att metoden förvisso är unik, men modern tekniska medel De inför fortfarande restriktioner, och det mestaoch och och och och och och och och och och och och och och och och och och och och och och och och och och och Och och och och och och från PCR-PCR.

Det vill säga att patienten utan tvekan har hiv. Viruset är obotligt, oförstörbart, listigt, lömskt, illvilligt, extremt smart och uppfinningsrik. Och inte ens den supermagiska PCR-metoden kan upptäcka var det listiga viruset gömmer sig från forskare och läkare.
Det visar sig att de å ena sidan berättar vad en underbar och mycket exakt PCR-metod är, den kan gissa en hel elefant och till och med en val från en molekyl - och å andra sidan mumlar de med hängande ögon. otydligt om den odetekterbara virusmängden hos tusentals patienter som har levt i decennier som lever med en HIV-infektionsdiagnos och inte tar antiretroviral behandling.

Sådana saker. De lurar oss som de vill. Var inte orädda idioter. Ta inte ordet av någon läkare eller vetenskapsman. De kommer att berätta tre gånger sju gånger om den kosmiska noggrannheten i PCR-tester, men bara en anmärkning om HIV-primrarna som används i det här fallet slår omedelbart hela den magnifika bilden i spillror. För för skojs skull kan vi säga att precis som Gallo patenterade de första HIV-testerna när han upptäckte ett falskt HIV-virus, på samma sätt som han kunde ha patenterat HIV-primers för PCR-diagnostik av HIV-infektion, eftersom primers i grunden är samma sak, att HIV antigener är några specifika biologiska substanser som endast är inneboende i detta virus (genomfragment eller specifika proteiner)...

.

HIV-infektion är en allvarlig virussjukdom med en lång asymptomatisk period, kännetecknad av skada på det mänskliga immunsystemet och farlig på grund av sin sena diagnos. Termerna "HIV" och "AIDS" används ofta omväxlande, i själva verket är AIDS det terminala (sista) stadiet av HIV-infektion, som varar 1-2 år. Enligt forskning, från infektionsögonblicket tills sjukdomen går in i terminalstadiet i frånvaro av behandling, går i genomsnitt 9-11 år. Tidig diagnos av sjukdomen med hjälp av ELISA- eller PCR-analys för HIV möjliggör snabb initiering av antiretroviral terapi, stoppar sjukdomens utveckling och i många år leva ett helt liv, trots närvaron av humant immunbristvirus i kroppen.

Vägar för HIV-överföring:

  • oskyddat samlag;
  • transfusion av blod och blodprodukter;
  • användning av icke-sterila instrument under medicinska ingrepp;
  • skador på medicinsk personal med osterila instrument;
  • perinatal infektion: överföring av viruset under graviditet och förlossning.

Tester för AIDS (HIV) ordineras:

  • under tillfällig sexuell kontakt;
  • vid planering av graviditet och under graviditet;
  • som förberedelse för sjukhusvistelse;
  • med plötslig viktminskning;
  • med en långvarig ökning av kroppstemperaturen av okänt ursprung.

Snabbt blodprov för HIV

HIV tillhör familjen retrovirus (Retroviridae), underfamiljen av lentivirus (Lentivirus). När det kommer in i människokroppen påverkar det celler i immunsystemet: T-hjälparceller, makrofager och dendritiska celler. Retroviruset omvandlar sitt RNA till en bit DNA, som integreras i värdcellens genom. När den drabbade cellen delar sig får dottercellerna virusgenomet. Kroppen producerar antikroppar mot virusantigenerna på ytan av infekterade celler, vars upptäckt används för att diagnostisera HIV-infektion med hjälp av den enzymkopplade immunosorbentanalysen (ELISA). Det rekommenderas att göra testet 1,5 - 3 månader efter det ögonblick av misstänkt infektion tidigare, ELISA-testet är inte informativt. Laboratorie Hemotest använder alternativ metod Real-Time PCR (PCR med detektering av produkter i realtid), som detekterar inte antikroppar mot HIV, utan själva viruset i kroppen. Med hög känslighet och tillförlitlighet låter metoden dig upptäcka även enstaka partiklar av viruset efter 10 dagar (i genomsnitt) från ögonblicket för potentiell infektion, när det fortfarande inte finns några antikroppar i blodet.
  • att upptäcka viruset under det "seronegativa fönstret";
  • om immunoblotresultatet är tveksamt;
  • för att bestämma genotypen av viruset - HIV-1 eller HIV-2;
  • att kontrollera den virala belastningen på kroppen;
  • att fastställa HIV-statusen för nyfödda om modern är HIV-infekterad;
  • efter en blodtransfusion.

Anonymt HIV-test

Enligt paragraf 2, artikel 8 i Ryska federationens federala lag nr 38-FZ, kan en patient anonymt ta ett HIV-test och få resultatet med hjälp av ett individuellt ordernummer, som inte är föremål för avslöjande. För den som av någon anledning inte kan komma för undersökning till någon av Gemotestlaboratoriets avdelningar rekommenderar vi att använda en sjuksköterska på besök för att ta blod och sedan registrera provet som tagits som en anonym beställning.

Observera: Resultaten av anonyma tester för AIDS (HIV) kan inte användas för professionella undersökningar, sjukhusvistelse eller försörjning till den behandlande läkaren på en klinik.

Resultaten av ett HIV-test, oavsett resultatet, utfärdas endast om patienten personligen kontaktar laboratorieavdelningen. Vid undersökning av minderåriga (under 14 år) - det juridiska ombudet som anges i ordern.

Resultat utfärdas mot uppvisande av kontrakt, uppskattning och identifieringsdokument för patienten själv eller patientens representant som anges i beställningen.

Via telefon och e-post studieresultat rapporteras inte.

OM ETT HIV-TEST FÖRESKRIVS FÖR SYFTE ATT FÖRBEREDA FÖR SJUKHUS ELLER FÖR FÖRSÄTTNING PÅ EN SJUKVÅRD, UTFÖRS REGISTRERING AV ANSÖKNINGAR FÖR DET under förutsättning att patienten tillhandahåller följande uppgifter:

1) För invånare i Moskva och Moskva-regionen

  • Efternamn, förnamn, patronym
  • Födelsedag, månad och födelseår
  • Registreringsinformation
  • Pass
  • Försäkring (försäkringsbrevets serie och nummer, försäkringsbolagets namn).
2) För invånare i andra regioner i Ryska federationen och utländska medborgare dessutom – en fotokopia (skanning) av passet.
  • Efternamn, förnamn, patronym
  • Födelsedag, månad och födelseår
  • Registreringsinformation
  • Försäkring (försäkringsbrevets serie och nummer, försäkringsbolagets namn)
  • Fotokopia (skanning) av pass

Hur lång tid tar det att testa för hiv?

Resultaten av ELISA-testet kan erhållas inom 1 arbetsdag, men inte tidigare än 1,5-3 månader från datumet för misstänkt infektion kan resultatet av PCR-diagnostik upptäckas inom 10 dagar från datumet för misstänkt infektion. Handläggningstiden för ett realtids-PCR-test är 3 arbetsdagar.

Ett antal sjukdomar som är sexuellt överförbara diagnostiseras med ELISA- och PCR-metoder.

Som förberedelse för undersökningen rekommenderas patienter inte att äta fet mat på två dagar. Liksom ett blodprov för virus tas prover på fastande mage, senast för 8 timmar sedan. Eliminera stekt mat och alkohol från din kost. Genom att följa dessa enkla krav kommer du att göra dina undersökningsresultat närmare mer exakta.

Listan över upptäckta sjukdomar inkluderar:

  • humant papillomvirus (HPV);
  • klamydia;
  • herpes (ett extra blodprov för herpes föreskrivs);
  • ureaplasma;
  • mykoplasma;
  • gonorré;
  • cytomegalovirus;
  • trichomoniasis;
  • toxoplasmos.

PCR för HIV vid diagnos av infektion

På grund av det faktum att det inte finns några kända symtom som uteslutande är karakteristiska för HIV-infektion, endast baserat på klagomålen från patienten som ansökt, är det inte möjligt att känna igen HIV-infektion.

HIV-testning har blivit en nödvändighet eftersom... Den nuvarande allmänna opinionen om denna sjukdom är att AIDS anses vara en dödsdom. Det har förekommit fall där en person, efter oregelbundna sexuella kontakter, ägnar ökad uppmärksamhet åt kroppens signaler, hittar och ofta uppfinner nya tecken på en dödlig sjukdom.

Att bedriva forskning i laboratorieförhållanden är för närvarande det enda och mest tillförlitliga diagnostiska alternativet (blodprov för HIV). PCR används för att fastställa följande hälsoproblem:

  • att bekräfta eller motbevisa förekomsten av HIV under det seronegativa fönstret;
  • med ett tvivelaktigt immunoblotresultat (för att fastställa en exakt beskrivning av den patologiska processen);
  • vid fastställande av genotypen av HIV-1 eller HIV-2;
  • att fastställa och övervaka kroppens virusmängd;
  • att identifiera HIV-status hos nyfödda vars mödrar är HIV-bärare;
  • under blodtransfusion.

PCR-metodens överlägsenhet vid diagnostisering av infektionssjukdomar:

När ett positivt resultat för HIV-infektion konstateras hos en patient som har sökt medicinsk hjälp, börjar de att göra mer djupgående studier av patienten för att klargöra och klargöra sjukdomens natur och dess förlopp, samt grunden och karaktären av sekundära sjukdomar och nivån av immunitetsskada.

ELISA- och PCR-analyser: forskningsdrag, principer och tolkning

Blod för analys tas från en ven. Under graviditeten tas blodprover för AIDS strikt. Slutsatser om frånvaron eller närvaron av immunbristvirus i patientens kropp görs baserat på närvaron eller frånvaron av antikroppar. ELISA ska inte utföras omedelbart efter misstänkt infektion, utan efter en tid så att antikroppar bildas i patientens blod. Går igenom olika skäl från 3 veckor till 3 månader.

Dessutom avslöjades att ELISA-resultatet kan vara både falskt positivt och falskt negativt. När man diagnostiserar en misstänkt infektion mycket tidigt, när antikroppar mot HIV ännu inte har dykt upp, erhålls ett falskt negativt resultat. I sådana fall, för att förtydliga, måste du testa blod igen för hiv efter 1-3 månader.

Ett falskt positivt resultat, tvärtom, kan erhållas när patienten har kroniska infektioner, cancer, autoimmuna sjukdomar utöver de som anges, avvikelser från normen är möjliga i andra situationer. Därför, om ELISA-resultatet är positivt, kontrolleras det definitivt igen med de mest känsliga metoderna.

PCR-diagnostik är en av de nuvarande mest högteknologiska metoderna för att bedriva forskning och används ganska ofta för att identifiera infektionssjukdomar. DNA-diagnostik omfattar flera på olika sätt För att bedriva forskning är den mest populära metoden idag polymeraskedjereaktionen, eller PCR.

Denna metod är baserad på att hitta en liten del av DNA:t från det orsakande medlet för en given infektion i vävnader för mikrostudier. I det här fallet innehåller en liten del av DNA:t upp till flera hundra DNA-par, som är i strikt ordning.

PCR-metoden är den mest exakta den kan användas för att fastställa förekomsten av ett virus, oavsett om antikroppar förekommer eller inte. Men trots dess noggrannhet har metoden en allvarlig nackdel, som just orsakas av dess ökade noggrannhet. Det är ganska stor sannolikhet att resultatet blir falskt. Därför, i samband med denna metod och utöver den, används andra metoder för att detektera genetiska och antigena material.

Kärnan i att diagnostisera hepatit med PCR

Det finns fem bevisade virus, orsakar sjukdomar lever. Dessa är de välkända hepatitvirusen A, B, C, D, E. Mycket sällsynta fall är när hepatit orsakas av Epstein-Barr-viruset, som egentligen är en typ av herpes. De listade virusen är representanter för olika familjer, vilket påverkar deras behandling beroende på typen av hepatit.

Varför är hiv och aids så läskigt, vilka diagnostiska metoder finns. Fördjupad information om PCR-studier.

Enligt statistik som tillhandahålls av Världshälsoorganisationen tillsammans med FN-organisationen UNAIDS har mer än 25 miljoner patienter dött av hiv och aids under de senaste fyrtio åren. Det är inte för inte som epidemiologer har kallat hiv 1900-talets pest, eftersom skadorna som denna infektion orsakar mänskligheten är kolossala. Länderna på den afrikanska kontinenten var hårdast infekterade. Infektionen slår hårt mot ekonomierna i redan instabila stater, och människorna är utblottade.

När symtom uppstår är snabb diagnos extremt viktig. infektion av kroppen med HIV-infektion, eftersom en terapi i rätt tid kan rädda eller åtminstone öka patientens liv. Nuförtiden har tekniska framsteg kommit långt: nyaste sätten diagnos av HIV- och AIDS-viruset, behandling är tillgänglig för alla människor på planeten, testernas tillförlitlighet kännetecknas av en liten grad av fel, och terapin kännetecknas av en hög procentandel av effektivitet.

Diagnos av HIV-infektion

I vårt land är det att identifiera förekomsten av HIV-infektion i en patients kropp komplex av analyser:

  • Enzymimmunanalys
  • Immunblotting
  • Polymeraskedjereaktion
  • Express tester

Enzymimmunanalys.

Screening (ELISA-test)är det inledande skedet för att fastställa infektion i kroppen. Det är baserat på proteinföreningar av viruset som bildas under artificiella förhållanden, som identifierar antikroppar som produceras av immunceller som en reaktion på infektion. Happening kemisk reaktion mellan reagenser, som ett resultat av vilket indikatorelementet ändrar färg. Detta betyder att testresultatet är positivt. Information med denna metod kan erhållas inom ett par veckor från infektionsögonblicket. Denna metod upptäcker inte förekomsten av infektion hos patienten, men bestämmer de antikroppar som produceras mot denna infektion. Det händer att produktionen av antikroppar börjar 10-15 dagar efter infektion, men i de allra flesta fall senare - efter 1-1,5 månader.

Information om sådan analys behandlas från två till tio dagar.

Tillförlitligheten av diagos för HIV stöds av IB-analys. Uteslutande positivt test IB för ett virus kan tjäna bra anledning för att bekräfta infektion.

Kärnan i analysen:

Ett venöst blodprov tas för analys i laboratoriet. Provet bereds ytterligare, proteinföreningarna som finns i det elektrifieras i testkammaren, och sedan fördelas de i gelsubstansen enligt deras molekylvikt. En pappersremsa belagd med reagenset placeras flera gånger i det preparerade provet. Om det finns antikroppar mot viruset i provet uppstår en kemisk reaktion och linjer blir synliga på teststickan. När 2 eller 3 streck av p24, gp41 och gp120 eller gp160 visas är testresultatet positivt.

Om ett positivt resultat erhålls från IB-analysen, med ett fel på en procent, kan en slutsats dras om förekomsten av HIV-infektion i kroppen.

Snabbtester för hiv och aids

Den senaste tekniken för att fastställa immunbristviruset i kroppen är uttrycksmetoder. Information om en sådan analys kan erhållas inom några minuter efter avslutad. Den högsta tillförlitligheten finns i immunokromografiska tester - speciella testremsor på ytan av vilka ett lager av reagens sprayas. Antikroppar som finns i testmaterialet kommer i kontakt med reagenset, vilket ändrar färgen på indikatorn. Efter några minuter visas två ränder, vilket indikerar närvaron av infektion. Närvaron av en enda linje betyder att det inte finns någon infektion.

Ett sådant test kan användas som ytterligare information om ett sådant test bekräftas med nödvändighet av andra studier.

Hur mycket kostar ett snabbt HIV-test?

Ett snabbt test för HIV kommer att kosta i genomsnitt 200-1000 rubel.

I senaste åren Metoden att detektera HIV genetiskt material genom metoder för replikering (amplifiering, reproduktion) av specifika gensekvenser, ofta kombinerade under namnet på en av varianterna av denna metod "polymeraskedjereaktion" (PCR), har blivit mycket populär.

PCR-metoden (polymeraskedjereaktion) bygger på den unika egenskapen hos NK (både DNA och RNA) - förmågan att självreproducera sig, som reproduceras artificiellt in vitro. I detta fall syntetiseras endast strikt specifika NA-fragment.

Den etiologiska faktorn för HIV-infektion är HIV-1- och HIV-2-virusen (Human Immunodeficiency Viruses) från Retroviridae-familjen. Patogenesen av HIV-infektion ligger i infektionen av celler med CD-4-fenotypen av viruset, som är inneboende i T-hjälparlymfocyter och vissa andra celler i människokroppen. Den direkta cytopatiska effekten som immunbristviruset utövar på dessa celler leder slutligen till döden på grund av aktiveringen av opportunistiska infektioner eller utvecklingen av tumörer.

Laboratoriediagnostik av HIV-infektion utförs i tre riktningar:

    serologisk diagnostik virusmarkörer med hjälp av enzymimmunanalys och immunoblotting-metoder, som består i att bestämma antigener och antikroppar mot HIV i blodserum.

    bestämning av viralt NK(proviralt-DNA eller RNA) PCR-metod, både i blodet och i blodkropparna.

    immunstatusstudie(kvantitativ bedömning av CD-4-lymfocyter), vilket mest adekvat utförs med flödescytometri.

Det är särskilt nödvändigt att notera vikten av PCR för att diagnostisera HIV-infektion hos barn under det första levnadsåret. Tidig diagnos av HIV-infektion hos barn i denna ålder är i princip omöjlig utan användning av PCR. Detta beror på det faktum att ett barn som fötts av en HIV-smittad mamma nödvändigtvis har antikroppar mot immunbristviruset. Det är inte möjligt att skilja mellan moderns och egna antikroppar mot HIV. Hos ett oinfekterat barn elimineras dessa antikroppar under påverkan av sitt eget immunsystem vid 6-9 månaders ålder, även om de i vissa fall kan cirkulera upp till 18 månader av livet, men inte mer än denna period.

Det bör noteras att PCR-testning endast är meningsfull om det finns ett fullständigt avslag amning barn av en hiv-positiv mamma från födseln, eftersom infektionsrisken är ganska hög och är cirka 5 %.

Således möjliggör PCR differentiell diagnos av HIV-status hos barn tidig ålder. Så om det finns ett positivt PCR-resultat för NK av immunbristvirus under de första 48 timmarna av livet, inträffade HIV-infektion i livmodern. Om PCR-resultatet är negativt under de första 48 timmarna, men blir positivt vid 7–14 dagars ålder, inträffade infektionen intrapartum.

För närvarande tillåter PCR inte bara diagnos, utan också övervakning av behandling av HIV-infektion genom att bestämma koncentrationen av RNA i plasma, samt identifiera kemoterapi-resistenta stammar av immunbristvirus. Att bestämma "viral belastning" i blodplasma är det bästa prognostiska kriteriet för förloppet av HIV-infektion och att bedöma effektiviteten av antiretroviral terapi.

Kända PCR-modifieringar för att diagnostisera HIV-infektion uppnår en känslighet på endast 98 %, det vill säga de detekterar endast 98 % av proverna från HIV-infekterade individer, vilket är betydligt lägre än vid användning av ELISA (upp till 99,9%). Av denna anledning kan de inte användas som bekräftande tester, eftersom de uppenbarligen ger fler falskt negativa resultat än immunoblot. PCR-tekniken uppträder i praktiken som alltför "känslig" för yttre fluktuationer och ger i odugliga händer och under otillräckligt välutrustade laboratorieförhållanden ett stort antal ospecifika (falskt positiva) reaktioner. Specificiteten för PCR beror också på urvalet av ingredienser som används i den, i synnerhet de så kallade "primrarna", som bör imitera "HIV-gensekvenserna", men som inte alltid kan väljas exakt. Misslyckat urval kan i synnerhet leda till att sådana tester kan upptäcka olika subtyper av HIV-1 med varierande framgång, till exempel upptäcka subtyp B och inte upptäcka subtyper A och G osv. Utvecklingen av dessa metoder går dock i snabb takt och det är möjligt att bättre uppsättningar av standardreagens snart kommer att dyka upp. I praktiken måste läkare ta hänsyn till de operativa egenskaperna hos de diagnostiska tester de erbjuder, initialt anta att deras område (praktiska) värde kan vara betydligt lägre än vad tillverkarna hävdar.

Den teoretiska fördelen med PCR är att den kan upptäcka HIV-infektion under inkubation och tidiga kliniska perioder, då antikroppar kanske ännu inte finns närvarande. Det kan dock ännu inte alltid identifiera smittade personer senare under infektionsperioden. I framtiden kan detta också vara viktigt när man försöker diagnostisera HIV-infektion hos personer som får antiretroviral behandling, då nivån av HIV i blodet minskar avsevärt. Den kombinerade användningen av två metoder, som kan vara en väg ut ur denna situation - ELISA och PCR, kommer tyvärr att göra forskningen mycket dyrare, särskilt om den utförs i massskala.

HIV-detektering med PCR-metod i blodet är möjligt i två varianter:

    Detektion av HIV-provirus-DNA i perifera mononukleära blodceller;

    Detektion av HIV-RNA i kroppsvätskor (till exempel plasma eller serum).

Nu PCR för HIV provirus DNA används som en diagnostisk teknik för direkt diagnos av HIV-infektion i följande fall:

    Under det serologiska "fönstret". Fast man ska komma ihåg! att känsligheten för PCR för HIV proviralt DNA varierar från 96 till 99 %, och därför bör PCR, trots höga känslighetsgrader, utföras antingen i samband med ELISA eller med efterföljande bekräftelse med ELISA;

    I händelse av ett tveksamt IS-resultat;

    Vid undersökning av barn födda av HIV-smittade mödrar. Användningen av PCR i detta fall gör det möjligt att minska tiden som krävs för att diagnostisera HIV-infektion från 18 månader till 3-6 månader.



Dela